【回答】PCR法（アンプリコア）に用いる場合の喀痰前処理法としては米国のCDCが推奨しているNALC-NaOH法をお勧めしております。この方法は検体全量をNALC-NaOHにて消化・雑菌処理した後, 3000ｇ, 15分間遠心集菌した沈渣を検査に用いるため検出感度が優れており, 欧米ではこの方法で処理した検体を塗抹鏡検, 液体培養, PCR等に用いています。アンプリコア, MGITではこのNALC-NaOH法を標準法としております。

　より感度と精度の高い検査のためには喀痰前処理において以下の３点を満たすことが必要となります。(1) 検体の均質化, (2) 雑菌の処理, (3) 遠心による集菌PCRにおいて十分な性能を得るためには特に(1)と(3)を満たすことが重要となります。また, 市販の喀痰処理剤の中にはPCR反応に負の影響を及ぼすものもありますので注意が必要です。
最近, NALC-NaOH法と喀痰溶解剤のスプータザイムを併用する方法が提案されています。この方法は特に(1)と(2)の効率を高めるために有効な方法であると考えられます。液体培地 MB／BacTにおいてはこの方法を標準法として推奨しています。またPCRにおいてもスプータザイム処理を併用することでPCR反応阻害率が低くなる傾向が認められます。

今後, 塗抹・培養・PCRにおける喀痰前処理法の統一, 液体培地・核酸増幅法を含めた迅速検査フローの体系化が望まれます。

NALC-NaOH法
Kent PT,Kubica GP : Pubric Health Mycobacteriology. A Guide for the Level III Laboratory. U.S.Department of Health and Human Services, Public Health Service, Center for Disease Control, Atlanta, U.S.A. 1985, 31-55.