【回答】
お答えします。
(1) P. acnesを液体培地で増殖させる方法。
　先ず, 適当な試験管かフラスコに本菌の発育支持力のある液体培地 (GAMブイヨンなど) を作って下さい。培養ですが, 嫌気性グローブボックスがあれば, 通常の通性嫌気性菌とまったく同じように行えばよいので, なにも難しいことではありません。嫌気性グローブボックスがない場合でも, あなたの培養したい容器のサイズに合わせて嫌気性ジャーなど, 嫌気性培養容器を準備すれば簡単に実施できます。注意点は, (1) 培地は, 可能な限り嫌気的な状態で使用するということです。通常の手順で培地を作る場合, オートクレーブから出したらすぐ水道水で冷却して使用して下さい。すぐに使用しない場合には, 使用直前に100℃で10分くらい加熱して, 水道水で冷却する操作 (脱気) をして使用して下さい。長期間の大気との接触により, 培地中に嫌気性菌に有害な過酸化物が蓄積してきますので, 大気中での保存は7日くらいにしておいて下さい。嫌気性容器の中で嫌気的に保存しておくと最高です。(2) 本菌は発育がやや悪いので, 十分な菌量を得るには長い培養 (3日以上) が必要となります。これを短縮したい場合には, なるべく試験管の上部まで培地を入れて空気を追い出し, 栓をブチルゴム栓に代えて, 培養中に栓がとれないように固定して, 震盪培養して下さい。このようにすれば, 特別嫌気培養しなくても発育するでしょう。もちろん, 嫌気ブローブボックスで震盪培養 (マグネチックスターラ−を使用してもよい) の装置を入れて培養するのが理想的です。(3) シードには, GAM寒天培地などの寒天培地の集落を使用して, 滅菌水中に濃厚な菌液を作成し, それを液体培地10 mlあたり1 mlほど加えて培養するとよいでしょう。この菌は酸素に耐性の菌ですが, 寒天培地上の集落は30分以上大気中に放置しないように常に心掛けましょう。

(2) 液体培地で増殖したP. acnesの菌数を測定する方法。よく使われている10倍希釈系列法は使えないでしょうか。 
　使用可能です。寒天培地は新鮮なもの, あるいは嫌気性に保存したものを使用して下さい。カウントしやすい集落を形成するまでに3日以上の培養が必要でしょう。

(3) 菌の保存方法。
　15%スキムミルク水溶液を作成し, セラムチューブ (2 ml) など, 適当な凍結可能な容器に1 mlほど分注し, 115℃, 10分間滅菌し, 冷蔵しておいて下さい。寒天培地上のP. acnesの集落を掻きとり, 濃厚菌液をつくり, ―60℃以下で凍結保存するのが最もよい方法でしょう。