培養後に, 寒天内部と表面にコロニーが見られる場合があります。一般細菌は, 好気的な条件で発育した中温性の細菌であるため, 寒天培地内部に存在するコロニーは数えてはならないのでしょうか??? (寒天内部には酸素がないため, 一般細菌は生育できないと考えました)。寒天表面のコロニーだけをカウントする方法で正しいのでしょうか???

　実際の写真も参考のため添付します。真上から撮影したものと, 斜めから撮影したものです。よろしくお願いいたします。
 

【回答】
　寒天内部に存在するコロニーも数えてください。寒天内部にも酸素 (溶存酸素) が含まれています。また, 日常的に検出される細菌は通性嫌気性細菌が多いため, 嫌気的環境でも, 好気的環境でも増殖可能です。一般細菌数は, 培地に増殖したすべての菌数を数えます。この場合, 培地に増殖したコロニー数が30個〜300個の培地を選ぶため, 希釈操作が必要です。写真からは, 培地に増殖している菌数はかなり多いと感じました。「シャーレに豆腐を1 ml」という意味がわかりませんが, 豆腐の10倍, 100倍, 1,000倍の希釈液で混釈培養をやってみてください。そうすれば, コロニー数が30個〜300個増殖する培地を得ることが出来ると考えます。

【質問者からのお礼】
　「標準寒天培地におけるコロニーカウント法」を質問させていただいた■■です。迅速なご回答をありがとうございました。個々で違う判定をしていた時期もあったので (本来, 判定基準は統一されなければならないのですが・・・), 大変助かりました。また, 質問文中の「豆腐1 ml」の表現がわかりづらかったようで申しわけありません。これは, “ガラスピペットを用いて豆腐を1 ml分吸引してシャーレに播種している”という意味です。今後も参考にさせていただこうと思います。