(1) DESOにて大腸菌群「陽性」, EMB寒天培地でも黒いコロニー検出, XM-G培地では赤色と青色, 両者のコロニーがあり, 「陽性」・・・という検体にて, 完全試験である乳糖ブイヨン培地にて試験を行ったところ, 培地の色調の変化なし, ガスの発生なしの「完全陰性」でした。XM-G培地にて完全にきれいなコロニーが出たのにも拘わらず, 「陰性」ということはあるのでしょうか??? それとも完全試験を初めて実施したため, うまく試験できていないのでしょうか??? なお検体は小麦粉です。

(2) 以前, 乾麺の大腸菌群試験をしたところ, DESO, EMB, XM-G培地で「陽性」反応でした。しかし, 1ヶ月以上経った後, 再び同様の試験をしてみると, XM-G培地には「陽性」反応が出ているにも拘わらず, DESOにはコロニーが検出されませんでした。これはどう判断したらよいのでしょうか???

お教えいただけますよう, お願い致します。

【回答】
　(1)の質問ですが,「検体にて, 完全試験である乳糖ブイヨン培地にて試験を行ったところ」というところが気になります (検体を直接, 乳糖ブイヨンに接種したと読み取れます。もし, そうであれば間違いです)。EMB寒天培地やXM-G寒天培地で大腸菌群の典型的集落を確認した場合, 非選択培地 (標準寒天培地) で純培養する必要があります。その後, その純培養菌を用いて乳糖ブイヨン培地へ接種して, 酸とガスの産生を確認してください

　(2)の質問は, 大腸菌群陽性だった検体を1ヶ月後 (保存状態が不明), 再び検査したら, XM-G寒天培地で大腸菌群を認め, DESOでは大腸菌群を認めなかったと理解しました。この原因として, 検体中に存在している大腸菌群がいろいろな原因で弱り始めていて, いわゆる“損傷状態”にあったと考えられます。XM-G寒天培地 (ラウリル硫酸ナトリウムを使用) とDESO (胆汁酸塩を使用) は選択剤が異なるため, その影響で菌発育に差が出てきたものと考えられます。

【追加質問】
　お忙しいところ, 丁寧な回答をありがとうございます。回答に対して, さらに質問をさせていただいてよろしいでしょうか。

　(1)の検体とは, EMB培地に繁殖した菌を直接乳糖ブイヨン培地に接種しました。回答にありますように, 標準寒天培地等での純培養は行っておりません。純培養を行って試験してみたいと思います。

　(2)の件につきましては, 損傷菌の可能性があるとのこと, よく理解できました。弊社では通常DESOで大腸菌群の試験を行っているため, DESOにて陰性になった場合は大腸菌群陰性としてしまっています。損傷菌の有無を考えた場合, DESOだけでの判断ではいけないのでしょうか???

お忙しいところ申し訳ありませんが、お教えいただけますでしょうか。

【追加回答】
　乾麺の衛生規範はありませんが,「生めん類の衛生規範などについて」(平成3年4月25日　衛食第61号)を参考にして回答します。生めんについては, 大腸菌群の規格はありません。しかし営業者の検査として, 1月に1回以上検査を行うこととあり, 検査項目も自主検査のため, 次の項目から選ぶとされています: (1) 微生物の有無, 細菌数 (生菌数), 大腸菌群及びE.coli, 黄色ブドウ球菌, カビ及び酵母, (2) 異物の有無, (3) 食品添加物の有無及びその量。検査後の措置は, 検査の結果不良なものは販売しないこととなっています。大腸菌群の検査方法は冷凍食品に準じて行うとされていて, 冷凍食品の項目では氷菓に準じて行うと記載されています。そこには, DESOを使って検査すると記載されているため, DESOで陰性なら大腸菌群陰性となります。この場合, 損傷菌について考慮する必要はありません。乾麺のような食品で大腸菌群陽性になった場合, 社内規定でどのようにするか, また, どうして大腸菌群検査をするのかなど, 社内で討議して意志決定してください。

【質問者からのお礼】
　お忙しいところ, 丁寧な回答をありがとうございました。参考にさせていただきます。